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B27 serum-free supplement (x50)
표
- 시 험 기 기 : 세포영상분석기(Cell imaging High Content Screening, Cellomics),
준
형광분석기(fluorescence microplate reader)
기
○ 시험방법 및 결과
술
- 배아줄기세포에서 신경세포로 분화시키며 분화관련단백질인 GABA-R (신경전달물
활
질 수용체), Nestin (신경전구세포 지표), TUJ-1 (뉴런 특이 β-tubulin), MAP2
용
(microtubule 관련 단백질), GFAP (astrocyte 관련 단백질)의 경시별 신경세포 분화
발현을 조사한 결과,
?Oct-4는 10일째부터 감소되었고 GABA-R, GFAP, Nestin, TUJ-1 및 MAP2는
6-8일째까지 증가하여 14일까지 지속되었음.
Table 1. 마우스 배아줄기세포의 신경세포 분화시 특이지표 변화 측정 결과
- Arsanillic acid, danofloxacin 및 methyl mercury의 분화과정세포에서의 세포독성
?MTT assay를 이용해 85% 세포증식 억제농도를 구한 결과, Arsanillic acid 4
mM, danofloxacin 0.08 mM, methyl mercury 0.0001 mM 이었음.
- Arsanillic acid, danofloxacin 및 methylmercury의 IC85를 최고농도로 하는 공시물질이
포함된 분화용 배지로 8일 동안 분화시킨 후 분화단백질의 발현도를 조사한 결과
?Arsanillic acid의 경우, Oct4는 0.125 mM 이상의 농도에서 대조군에 비해 발현이
유의하게 증가되었으며 Nestin은 0.125 mM, GABA-R는 2 mM, GFAP는 1 mM,
TUJ-1는 0.5 mM 이상의 농도에서 발현이 유의성 있게 감소되었음.
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