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항생제 내성균 검사 방법
□ 세균 분리·동정
1. 대장균(Escherichiacoli)
가.증균배양
도체 표면을 swab한 멸균 거즈를 넣은 멸균백에 일정량의 Buffered Peptone Water에 넣고
stomacher로약60초진탕하여만들어진현탁액을시험용액으로사용한다.이현탁액은대장균,
살모넬라균, 장알균, 황색포도알균 분리에 이용한다. 가축의 분변시료는 증균과정 없이 직접
선택배지에서 분리한다.
나.분리배양
Chromogenic E. coli/Coliform medium에 37℃에서 18∼24시간 배양한 후 보라색 집락을
시료당 3개의 집락을 선택하여 Eosin Methylene Blue(EMB) agar에 도말한다. EMB agar는
37℃에서 18∼24시간 배양 한 후 금속성 광택을 나타내는 집락을 3개 선택하여 MacConkey
agar(MA)에 도말하여 37℃, 18∼24시간 배양한다.
다.확인시험
MA에서 분홍색 집락을 선택하여 그람염색한 후 IMViC[(Indole (+), MR(+), VP(-), Citrate(-)],
자동화킷트[Vitek (GN card), API kit], Maldi-Tof를 이용하여 최종 동정한다.
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www.qia.go.kr
□ 세균 분리·동정
1. 대장균(Escherichiacoli)
가.증균배양
도체 표면을 swab한 멸균 거즈를 넣은 멸균백에 일정량의 Buffered Peptone Water에 넣고
stomacher로약60초진탕하여만들어진현탁액을시험용액으로사용한다.이현탁액은대장균,
살모넬라균, 장알균, 황색포도알균 분리에 이용한다. 가축의 분변시료는 증균과정 없이 직접
선택배지에서 분리한다.
나.분리배양
Chromogenic E. coli/Coliform medium에 37℃에서 18∼24시간 배양한 후 보라색 집락을
시료당 3개의 집락을 선택하여 Eosin Methylene Blue(EMB) agar에 도말한다. EMB agar는
37℃에서 18∼24시간 배양 한 후 금속성 광택을 나타내는 집락을 3개 선택하여 MacConkey
agar(MA)에 도말하여 37℃, 18∼24시간 배양한다.
다.확인시험
MA에서 분홍색 집락을 선택하여 그람염색한 후 IMViC[(Indole (+), MR(+), VP(-), Citrate(-)],
자동화킷트[Vitek (GN card), API kit], Maldi-Tof를 이용하여 최종 동정한다.
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