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1-2-1-08
Pasteurella
Scientific Co. Model
Sonic Dismembrator 550)
처리된
multocida
균액을
8,000rpm
에서
25
분간 원심하여
상층액을
cDNT
를 함유한
항원 원액으로 한다.
3.2.5.2. cDNT
단백질량 측정
Bradford assay
를 이용해 처리된 단백질
(toxin)
OMP(outer membrane
protein)
의 량은
30
/ml, cDNT
의 량은
200
이상 되게 한다
3.2.5.3. cDNT
의 불활화
원심분리한 상층액의
toxin
불활화는 포르말린을
0.3%
되게 첨가하여
37℃에서
3
3.3.
원액검사
3.3.1.
순수시험
동물용 생물학적제제 일반 시험법
-4
에 의한 검사에 따른다
3.3.2.
무균시험
동물용 생물학적제제 일반 시험법
-5
에 의한 검사에 따른다
3.3.3.
불활화 확인시험
3.3.3.1.
재료 및 시험
불활화 된 각 항원액을 각각의 선택배지에 각 균주별로 이식하여
37℃
에서
2
3.3.3.2.
판정
세균의 발육이 인정되어서는 아니 된다.
3.4.
최종원액
3.4.1.
항원농도조절
Bordetella bronchiseptica
1
두분
(2ml)
를 기준으로
사균체는 5.22×10
cfu,
항원
OD 1.2 410nm)
Pasteurella multocida
사균체는 1.6P×10
cfu,(
항원
OD 1.2 410nm),
Pasteurella multocida
toxoid, 175 RU (250
이상 되게 각 항원의
농도를 조절한다.
3.4.2.
항원혼합

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