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시험방법
가. LgBiT 발현 세포주 제작을 위한 항생제 농도 결정시험
5
- 구제역 감수성 세포인 LF-BK 2×10
cells/ml로 24well plate에 분주하고 24시간 배양함
- 배양된 세포에 Hygromycin B(항생제)를 100~700 ug/ml까지 분주하고 기간별로 세포의 상태
를 관찰함.
- 세포가 90%이상 사멸하는 Hygromycin B(항생제) 농도를 선정함.
백
LF-BK 세포에 대한 항생제 농도 결정 시험
신
주
분
석
나. LgBiT 발현 세포주 제작
및
5
- 구제역 감수성 세포인 LF-BK 2×10
cells/ml 분주하고 24시간 배양함
개
- LgBiT 발현 벡터를 이용하여 LF-BK 세포내 형질전환(Transfection) 하고, 24시간 후 700㎍/㎖
발
농도로 항생제 처리 및 계대 배양함.
분
야
- 이와 같은 방법으로 30계대 이상 세포 배양을 진행하고, LgBiT 단백질 발현을 웨스턴 블랏
(Western blot)으로 확인함.
- 배양된 세포에 Hygromycin B(항생제)를 100~700 ug/ml까지 분주하고 기간별로 세포의 상태
를 관찰함.
LgBiT 발현 세포주에서 LgBiT 단백질 발현 확인
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