총 953페이지

사용한다.
3. 96 well plate
에 항원 희석액
8.2 g,
증류수
94
, pH 9.3)
well
100
2
4
분주한 후
, 96 well ELISA plate
를 밀폐하여 교반기를 사용하여
120 rpm(20 25 )
30
분 동안 배양한 다음
PBST
용액으로
3
4. 96 well ELISA plate
PBST
용액으로 희석한
horseradish peroxidase-conjugated
K 88
특이 단크론 항체를 각
well
100 ㎕
씩 첨가한 다음에 밀폐하여 교반기를 사용
하여
120 rpm(20 25 )
에서
30
분 동안 배양한 후에
PBST
용액으로 회 세척한다
3
5.
사용 전
15
분 이내에 만든 기질액
(ABTS substrate system)
well
100 ㎕
씩 옮긴
, 96 well ELISA plate
를 밀폐하여 교반기를 사용하여
120 rpm(20 25 )
에서
10
분 동안 배양한다.
6. ELISA reader (with dual wavelengths 405
test, 490
reference)
로 신속하게 흡
광도를 측정한다.
Competitive indirect ELISA method
1. K88
항원을 차가운
0.05M carbonate coating buffer(pH 9.6)
로 제조회사에서 권장하
는 비율대로 적절하게 희석한 후에
ELISA plate
의 각
well
100 ㎕
씩 넣고 실온에
30
분 동안
coating
한 후
에서 하룻밤 동안 둔다
2. 96 well ELISA plate
를 실온에서
30
분 동안 평형을 위해 놓아둔 후에
0.05% Tween
20
을 함유한
용액
(PBST, pH 6.5)
으로
2
3. Blocking buffer(1% bovine serum albumin
을 함유한
PBS) 150
를 모든
well
에 첨
가한 후 교반기를 사용하여
100 120 rpm(37 )
에서
60
분 동안 배양한 다음
PBST
용액으로
2
4. Transfer plate
blocking buffer
100
씩 가한 후
standard pili, reference
항원
백신으로부터 추출한 검사용 항원을 첫 열에
100
가한 다음 단계별로
열에서
열까지
2
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1-2-02-10

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