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5. 연구용역 과제일람표 / 아. 농림축산검역검사 R&D 연구용역
○ 연구성과
○ 우결핵균 배양액의 일차분획을 SDS-PAGE와 2-DE로 분리하고 M. bovis 감염혈청을 이용한
immunoblotting 분석결과 16개의 새로운 항원을 동정하였, 이들 중 6개의 단백에 대해서는 유전
자재조합단백질을 대장균에서 생산 정제함. 우결핵균 배양액으로부터 native MPB70과 Ag85항원
을 정제함.
○ 일차적인 진단적 유의성 평가를 통해 6종 항원(BCG_0389, BCG_1509c, BCG_2330, BCG_2765,
BCG_3488c, native BCG_Ag85)을 선별함. 이외에도 진단적인 유의성이 있는 지질항원인 LAM과
PIM을 정제함.
○ 17개의 결핵 혈청항원에 대한 진단적인 유의성을 수의과학검역원 검체를 활용하여 평가한 결과
7개의 항원(38 kDa, HspX, CysA, Rv1605, Rv3593, MAV5183, MAV4300)을 선별함.
○ 최종적으로 경상대와 수의과학검역원에서 수집한 검체인 PPD양성 81검체, PPD음성 126검체를
대상으로 17종의 항원(MPB70과 MPB83항원, 6종 우결핵 항원, 7종의 결핵항원, LAM과 PIM)에
대한 IgG와 IgA항체반응을 평가하였음.
○ MPB70과 MPB83에 대한 IgG항체의 민감도는 경상대 field 검체에서는 각각 78%, 69.5%였고,
IgA는 각각 86.4%, 81%였고, 또한 수의과학검역원 검체에서는 두 항원에 대한 IgA항체의 민감
도는 각각 100%, 95.5%로써 IgG보다는 IgA가 진단적인 유의성이 더 높았음. 다음으로는 LAM과
BCG3488가 진단적인 유의성이 높았고, 이외에도 다중항원으로 포함될 수 있는 항원으로는 PIM,
Ag85, Rv3593, MAV5183, 38 kDa, HspX 등을 발굴하였음.
○ IgA의 경우 MPB70과 MPB83을 조합한 경우 민감도가 86%였지만 38 kDa를 조합하는 경우 91%
의 민감도를 나타내었음. 이때 특이도는 88.1%임. IgG의 경우 MPB70과 MPB83을 합한 경우 민
감도가 81.5%였고, LAM과 BCG_3488c의 결과를 조합하면 87.7%의 민감도를 나타냈음.
○ 개발된 새로운 항원은 우결핵의 혈청학적 진단법 개발에 활용
○ 발굴된 항원은 우결핵의 면역학적 연구나 피부반응검사 또는 T-cell based immunodiagnosis에
적용 가능성 연구에 활용
한글
우결핵병, 혈청학적 진단, 단백분석, 재조합단백질
Keywords
(5개 내외)
영문
Bovine tuberculosis, Serodiagnosis, Proteomics, Recombinant proteins
1845
www.qia.go.kr

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