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7) Neorickettsia risticii
가. Neorickettsia risticii 감별진단을 위한 표준물질 합성
- N. risticii 16s rRNA gene sequence(MK760560.1) 찾아 해당 primer에 의해 증폭되는
염기서열을 합성하여 pBHA vector에 삽입, 표준물질 제작(2,599bp)
그림 5. N. risticii 16s rRNA gene(597bp)을 포함하는 pBHA vector
나. 분변내 DNA 추출을 통한 유전자 진단법
Product
PCR
Target gene
Primer sequences
Ref
size(bp)
conditions
ATTTGAGAGTTTGATCCTGG
Vet Parasitol
N. risticii
597
94℃ 5m → 30 cycles
GTTTTAAATGCAGTTCTTGG
(16S rRNA)
(94℃ 60s, 60℃ 120s,
(2006)
CTAGCGGTAGGCTTAAC
nPCR
527
72℃, 60s) → 72℃ 7m
139:262-6
CACACCTAACTTACGGG
N. risticii 양성콘트롤을 합성하여 분석적 민감도 측정결과
527bp에서 증폭산물 확인
최소검출한계는 100 copies
그림 5. N. risticii PCR 결과 및 민감도
8) Rhodococcus equi
가. 2020년 표준기술편람 「로도코커스 이콰이 (Rhodococcus equi) 분리 및 동정기법」참고
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