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(A)
(B)
그림. 1. Asia 1/Shamir에 대한 단클론항체(1F9) (A)와 C20-HRP VHH(B)를 이용한 indirect ELISA 실험
LPB-ELISA 반응 최적화(optimization)
- 확보된Asia1형shamir시험백신접종돼지혈청을표준혈청으로사용하여checkerboardtitration
방법을 이용하여 ELISA 항원, capture & detector antibody의 최적의 반응조건을 결정 (표.1)
표 1. Asia 1형 Shamir주 LPB-ELISA의 최적 반응 조건
Optimal reaction condition
2
ELISA antigen(항원)
0.5 μg/mL
2
3
Test sera(가검혈청)
1/20 희석
표
Capture antibody(1F9)
1/100 희석
준
기
detector antibody (HRP conjugated C20, Mammalian
술
1/2 희석
편
cell 발현 상층액)
람
진단성능(diagnostic performance) 평가
- 구제역 Asia1형 shamir주 바이러스에 대한 중화항체검사법(VNT)을 표준(gold standard)으로 설
정하고 70개의 기 확보된 Asia1형 shamir 시험백신 접종 돼지 혈청을 이용한 LPB-ELISA 진단
성능을 평가함
※ Asia1/shamir LPB-ELISA는 77%의 민감도(sensitivity)와 75%의 특이도(specificity)를 나타냄(표.2)
표 2. Asia 1형 Shamir주 LPB-ELISA기법의 진단 민감도와 특이도
VNT
Sensitivity
Specificity
Positive
Negative
Total
Positive
30
4
34
LPB-ELISA
77%
75%
Negative
9
27
36
Total
39
31
70
34

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