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(나) 본검사 (Day 2)
⑤ screening test에 준함
☞ 각 희석 배수별로 반복 well 사용, 1개 플레이트 당 10개 혈청검사 가능 (표 6 참조)
표 6. 구제역 혈청검사용 ELISA plate 디자인
희석
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
배수
A
C++
C++
혈청1
2
3
4
5
6
7
8
9
혈청10
1:20
B
C+
C+
혈청1
2
3
4
5
6
7
8
9
혈청10
1:40
C
C-
C-
혈청1
2
3
4
5
6
7
8
9
혈청10
1:80
D
Ca
Ca
혈청1
2
3
4
5
6
7
8
9
혈청10
1:160
E
C++
C++
혈청1
2
3
4
5
6
7
8
9
혈청10
1:20
F
C+
C+
혈청1
2
3
4
5
6
7
8
9
혈청10
1:40
G
C-
C-
혈청1
2
3
4
5
6
7
8
9
혈청10
1:80
H
Ca
Ca
혈청1
2
3
4
5
6
7
8
9
혈청10
1:160
* 혈청 분주 시 배수별로 피펫 팁을 반드시 교체하여 옮김
백
신
평
다. 결과 판독
가
분
실험결과 적합성 검증
야
(가) 항원 대조 well(Ca) 흡광도
☞ 450 nm 필터를 사용하여 흡광도 측정하며 4개 항원 대조 well 중 최고·최저 값을 제외한
나머지 2개 well의 흡광도가 0.8-1.9 사이에 위치
(나) 대조 well 억제 백분율(percent inhibition, PI%)의 적정여부 확인
대조군또는검사혈청의OD값
PI(%)값 = 100 - (
x100)
Ca의OD중간평균값
- 4개 대조 well의 PI 값 중 3개 PI 값이 아래 범위안에 포함되어야 실험유효성 인정
- UCL(upper control limit), LCL(lower control limit)
Control
UCL
LCL
Ca(PI)
25
-25
C++(PI)
100
85
C+(PI)
85
50
C-(PI)
49
39

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