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표준기술활용 기술서
연
2010년 국내발생 구제역바이러스의 병원성 및
과 제 코 드
구
분자역학적 분석 연구
성
과 제 명
과
(The study on the molecular epidemiology and
( 영 문 )
I-AD16-2009-11-01
pathogenesis of FMDV strains isolated in 2010
활
from the Republic of Korea)
용
집
제
목
Pan-serotype 구제역바이러스 실시간 정량분석기법
주담당자
직급
소속
이광녕
수의연구사
구제역진단과 바이러스진단연구실
담 당 자
김수미, 박종현, 신연경, 고영준, 김수미, 김병한
1
현황 및 문제점
○ 최근 실시간 유전자검사법(Real-time PCR, rPCR)을 이용한 진단법이 진단 및 기타 생물학
분야에서 폭넓게 활용되고 있음.
○ 2010년 국내에서 개발되어 표준기술 활용중인 rRT-PCR의 primer 및 Taqman probe는 구제
역의 3D 부위에서 설계되어 2000년 및 2002년 국내발생된 구제역바이러스에 대한 검출효율이
높으나, 2010년이후 국내 발생한 구제역바이러스(동남아형)에 대해서는 상대적으로 검출
감도가 다소 낮게 평가됨.
○ 미국에서 개발된 rRT-PCR용 primer와 Taqman probe는 동남아 유래의 구제역 바이러스에
대해서도 높은 검출감도를 유지함. 따라서, 이 primer 및 Taqman probe를 이용한
rRT-PCR법을 표준기술로 등록하여 활용할 필요가 있음.
※ 새로운 형의 구제역바이러스의 출현 등을 고려할 때 복수의 pan-serotype용 rRT-PCR
kit를 갖추어 활용에 대비하는 것이 바람직함.
2
연구성과내용
○ 모든 시약을 master mix형태로 제작하여 실제 상황에서 최소한의 수작업으로 진단을 할
수 있도록 함.
○ 정확한 진단 결과 도출을 위해 임의의 internal postitive control(IPC) RNA 및 이에 대응
하는 primer 및 Taqman probe가 대조시료 및 모든 검체 반응시 동시에 반응되도록 하여
시료내 게놈 증폭을 방해하는 인자가 있을 경우 파악이 되도록 하는 방법을 구현함.
○ 따라서, 구제역바이러스 게놈에 대한 증폭은 시료내 구제역바이러스가 존재할 경우만 일어
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