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[ 붙임 ] 1. 구제역바이러스 게놈 실시간 분석기법 매뉴얼
연
구
가. 서열정보
성
- primers : 5'-ACTGGGTTTTACAAACCTGTGA-3', 5'-GCGAGTCCTGCCACGGA-3'
과
- probe : 5'-TCCTTTGCACGCCGTGGGAC-3'
활
※참고논문 : Callahan JD외, Use of a portable real-time reverse transcriptase-polymerase
용
chain reaction assay for rapid detection of foot-and-mouth disease virus. J
집
Am Vet Med Assoc. 2002
나. 실험방법
1) 시약 제조사 : 바이오니아사
(조성)
(조건)
1. FMDV Master mixture
44.0
45℃ 15분
2. Internal positive control(IPC)
1.0
95℃ 5분
3. Sample RNA
5.0
95℃ 5초
Total
50.0
60℃ 30초(scan)
45 cycle
20℃ ∞
(Reporter-Quencher)
FMDV probe : FAM-BHQ, IPC probe : TAMRA-BHQ
2) 시약 제조사 : 엔지노믹스사
(조성)
(조건)
1. FMDV Master mixture(2x)
10.0
55℃ 20분
2. Sample RNA
3.0
95℃ 10분
3. DW(RNase Free)
7.0
95℃ 15초
Total
20.0
60℃ 45초(scan)
45 cycle
20℃ ∞
(Reporter-Quencher)
FMDV probe : FAM-BHQ, IPC probe : TAMRA-BHQ
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