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2014
농림축산검역검사기술개발사업 연구과제제안서
Ⅲ. 연구방법 및 수행전략
1. 재 료
가. 바이러스, 유전자 및 세포
1) 바이러스 : 구제역바이러스 야외분리주, 백신주
2) 세포주 : IBRS-2(swine kidney cell), BHK-21(baby hamster kidney cell)
나. 동물 : 실험동물(토끼, 기니픽) 및 목적동물(소, 돼지, 염소)
다. 기타 : 세포배양 및 분자생물학 관련 장비, 시약, 초자류 및 기타 잡품
2. 연구전략 및 방법
가. 국내분리주 및 백신주 바이러스 불활화 항원 제작 및 특성분석
1) FMDV O 안동주, A maleysia97, O1 manisa,Asia1 shamir 를 BHK21 상층액 BEI
inactivant이용하여 불활화 및 PEG 농축
- 항혈청생산을 위한 항원 후보주 각각의 146S 정제조건 설정 및 특성 분석
2) 혈청형별 항혈청 제작
- 토끼항혈청(capture), 기니픽 항혈청(detector) 제작
3) 목적동물에서의 혈청형별 항혈청 제작
- 국내분리주 및 백신주 접종(또는 백신)한 목적동물에서 항혈청 제작
나. 혈청형 ELISA 유효성평가
1) 혈청형별 ELISA 최적반응조건 선정
- Capture ab 농도, 항원항체 반응시간, Detector ab 농도 등 결정
2) 혈청형별 ELISA 민감도 및 특이도 평가
- Heterologous FMDV strains이용 Cross reactivity 평가
- Determine threshold values using non-vaccinated serum
-국내분리주또는백신주접종(또는백신)한목적동물혈청을적용한민감도평가
3) Correlation between neutralizing Ab titres and LPBE Ab titres
- 중화시험법과 LPB진단법간의 백신항체역가 상관성 비교
Ⅳ. 연구성과 예측 및 기대효과
가. 중화시험법을 대체하여 차폐실밖에서도 백신의 방어항체를 평가할수 있는 기법 개발로
본부 외 시도 시험소에서도 사용가능
나. 백신Quality Control Poteny 평가시 동물시험을 대체하여 혈청학적 검사를 통한 항체
역가로 protection 즉 방어항체역가를 알 수 있어 백신검정용으로 사용가능
다. 향후,구제역 연구소 인증시 표준진단액으로 활용가능
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농림축산검역본부

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