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연구용역결과보고서
정제하고 spectrophotometry로 정량화한다. High Capacity RNA-to-cDNA
Kit로 역전사하고 PPAR-γ에 대한 RT-PCR을 Taqman Gene Expression
Assay primer-probe sets로 실시한다.
? 측정가능 연구 유형: 시험관 내 시험(In vitro), 생체 내 시험(In vivo)
⑨ 경부임파절 세포 수(T, B세포)
콜라겐 관절염의 발증에는 세포성 면역이 관여하고, 증상의 진행에는 세포성
면역과 체액성 면역의 상호작용이 중요한 역할을 한다. 관절염이 진행됨에 따
라 마우스 경부 임파절 세포수의 양은 증가하고 경부 임파절 세포수의 감소
는 관절염 진행 억제를 의미한다.
? 측정법: 경부임파절 세포 수 측정은 정제된 림프구를 RPMI 또는 PBS에
washing하고 PE-, FITC-, 또는 Quantum Red-conjugated 항체들(B :
CD5, CD23, CD43, CD80, CD86; T: CD4, CD8, CD25, CD39)과 30분
동안 배양하여 세포를 표지한다. 표지된 림프구를 EPICS XL-MCL flow
cytometer 또는 FACSCalibur flow cytometer 또는 immunofluoresent
staining and flow cytometric analysis로 측정한다.
? 측정가능 연구 유형: 시험관 내 시험(In vitro), 생체 내 시험(In vivo)
⑩ 콜라겐 특이적 항체 수준
관절염 발증 후, 콜라겐 특이적인 항체 수는 현저히 증가한다. 콜라겐 특이
적 항체 수의 감소는 콜라겐에 대한 체액성 면역 억제를 가져와 증상의 진행
을 방어한다.
? 측정법: 콜라겐 특이적 항체 수준은 혈청에서 ELISA로 측정한다. Chick
collagen type 2을 Plates에 5μg/ml로 하룻밤동안 4도에 배양하여 붙이
고 IgM, IgG, IgG1, IgG2b, 또는 IgG2c conjugated with AP 등의 항체
들과 반응시킨 뒤, PNPP substrate로 발색시켜 405nm에서 판독한다.
anti-mouse Ig(H+L) (human adsorbed)를 standard로 하여 표준 선형
곡선을 얻는다
? 측정가능 연구 유형: 시험관 내 시험(In vitro), 생체 내 시험(In vivo)
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