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농림축산검역검사기술개발사업 2015 연구보고서
다. 큐열 혈청학적 양성예의 염소태반을 이용하여 면역염색 진단법을 확립하였음
? 큐열 면역염색 진단법 확립
- 항원도출: Tris/Citrate/EDTA buffer(pH6.0), 121℃, 15분 반응
- 1차 항체: MAB 313(네덜란드중앙수의연구소 제공), 30℃에서 32분 반응
- 2차 항체: Envision Mouse (DakoCytomation K 4001) , 37℃에서 12분 반응
- 발색: DAB
? 실험결과 : 태반의 trophoblast가 양성(갈색으로 발색) 반응을 보임
Fig.2.태반에서 큐열 면역염색 결과
라. 염소의 질 분비물을 채취하여 real-time PCR과 PCR을 적용한 결과 real-time
PCR의 양성율이 다소 높았음(Table 6)
Table 6. 염소 질분비물을 이용한 real-time PCR과 PCR 비교
vaginal swabs
stall
sero-positive(%)
Real time(%)
PCR(%)
A
50/95(52.6)
6/95(6.3)
1/95(1.1)
B
31/32(96.9)
26/32(81.3)
0/32(0.0)
C
15/15(100.0)
6/15(40.0)
1/15(6.7)
D
20/20(100.0)
15/20(75.0)
3/20(15.0)
E
67/74(90.5)
30/69(43.5)
59/69(85.5)
F
18/30(60.0)
16/29(55.2)
17/29(58.6)
G
4/7(57.1)
0/7(0.0)
1/7(14.3)
Total
205/273(75.1)
99/267(37.1)
82/267(30.7)
592
농림축산검역본부

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