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2-2-2-13
3.2.2.
잡종세포수확
hybridoma
의 증식을 확인 한 후 상층액을 수확한다 수확한 원액의 일부는
원액검사에 사용하고 나머지는
-20
에 보존한다
3.2.3.
항체농도조절
항체는 원액검사의 항체가 형광항체법 시험결과에 의하여
8
조절한다.
3.3.
원액검사
3.3.1.
무균시험
동물용 생물학적제제 일반 시험법
-5
에 의한 검사에 따른다
3.3.2.
항체가 측정시험
3.3.2.1.
재료 및 시험
혹은
MDCK
세포
-MEM, PBS, slide glass, acetone, anti-mouse
IgG FITC conjugate, mounting buffer(
부기 를 사용한다 돼지 인플루
4)
엔자 바이러스를
세포에 감염시킨 후
50%
가 일어났을 때
0% acetone(-20
으로
10
분간 고정한 후 건조시킨다 생산된 항체
2
계단 희석하여 고정된 세포에
100
부주한 후
30
분간 반응시킨
다 이 후
PBS(
부기 로
3)
3
2
차 항체인
anti-mouse IgG FITC
conjugate
100
분주 후
30
분간 반응시킨 다음
PBS(
부기
3)
3
세척한다
. Mounting buffer cover slide
를 덮고 형광현미경으로 관찰한
3.3.2.2.
판정
돼지 인플루엔자 바이러스에 감염된 세포의 세포질에 특이 형광이
8
이상에서 관찰되어야 하며 대조세포에서는 형광이 인정되어서는 아니된다.
3.3.3.
특이성 시험
3.3.3.1.
재료 및 시험
돼지 인플루엔자 특이항체의
cover slide
표본 또는 돼지 인플루엔자 특이
항체 감염돼지의 폐 조직 박절표본과 대조로서 정상 배양세포 또는 건강
한 돼지의 폐조직의 박절표본을 직접법에 의하여 검사품으로
37
에서
60
분간 반응하고 형광염색하여 형광 현미경으로 관찰한다.
3.3.3.2.
판정

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