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56¡ÆC¿¡¼­ 30ºÐ°£ ºñµ¿È­ÇÑ °í¾çÀÌ Ç÷û
CRFK ¼¼Æ÷
Feline parvovirus(ATCC No. VR-648)
¹ÙÀÌ·¯½º Áõ½Ä
1) CRFK ¼¼Æ÷¸¦ Çöó½ºÅ©¿¡ 70~90% monolayer°¡ Çü¼ºµÇ°Ô ¹è¾çÇÑ´Ù.
2) Seed stock feline parvovirus¸¦100~1,000TCID50/100ulµÇ°Ô Èñ¼®ÇÏ¿©¹è¾ç¼¼Æ÷ Àü¸é¿¡
µµÆ÷µÉ ¼ö ÀÖÀ» Á¤µµÀÇ ¾çÀ» Á¢Á¾ÇÑ´Ù.
3) 37¡É¿¡ 60~90ºÐ µ¿¾È ¹ÝÀÀ½ÃÄÑ ¹ÙÀÌ·¯½º°¡ ÈíÂøµÇµµ·Ï ÇÑ´Ù.
4) 37¡É·Î ¿¹¿­ÇÑ À¯Áö¹èÁö(2-3% FBS, D-MEM)¸¦ Àû´ç·® ÷°¡ÇÑ´Ù.
5) ¸ÅÀÏ CPE¸¦ °üÂûÇÏ¿© ¼¼Æ÷ monolayerÀÇ 75~95%°¡ CPE¸¦ º¸ÀÏ ¶§(¾à 76-96½Ã°£)±îÁö
¹è¾çÇÑ´Ù.
6) ¹è¾çÇöó½ºÅ©´Â³Ãµ¿(-70¡É) ¹×Çص¿À»3ȸ¹Ýº¹ÇÏ°í, 8,000rpm¿¡¼­10ºÐµ¿¾È¿ø½ÉºÐ¸®ÇÑ
ÈÄ »óû¾×À» ¼ö°ÅÇÏ¿© ÀÏȸ »ç¿ë·®¾¿ ºÐÁÖ ¹× ³Ãµ¿(-70¡É) º¸°üÇÑ´Ù.
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1) ¹ÙÀÌ·¯½º ¿ª°¡ ÃøÁ¤
-1
-8
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~10
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³ª. ¹ÙÀÌ·¯½º Èñ¼®¾×À» Èñ¼®¹è¼ö¸¶´Ù 8°³ÀÇ well¿¡ °¢°¢ 100§¡¾¿ Á¢Á¾ÇÑ´Ù.
4
´Ù. ¼¼Æ÷ ºÎÀ¯¾×À» Àüü well¿¡ 100§¡¾¿ ºÐÁÖÇÑ´Ù(¾à 3x10
cells/100§¡).
¶ó. ¹è¾ç 48½Ã°£ ÀÌÈĺÎÅÍ CPE¸¦ °üÂûÇÑ´Ù.
¸¶. Karber method·Î ¹ÙÀÌ·¯½º ¿ª°¡(TCID50)¸¦ °è»êÇÑ´Ù.
°ø½Ä : ¥ÒT50 = t* + ¥Ät
t* = Á¢Á¾ÇÑ well Àüü¿¡¼­ 100% °¨¿°À» ³ªÅ¸³»´Â ÃÖ°í Èñ¼®¹è¼ö
¥Ät = (t*¿¡¼­ °¨¿°µÈ well ¼ö + t* ÀÌ»óÀÇ Èñ¼®¹è¼ö¿¡¼­ °¨¿°µÈ well ¼ö) - 1/2
¿¹)
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Èñ¼®¹è¼ö
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8/8
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0/8
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796

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