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다. Peroxidase substrate kit, DAB (Vector SK-4100)
라. PBS -
T : 0.05% Tween 20
함유
마. Anti-rabies monoclonal antibody
(MoAb) :
정밀진단과 분양 또는 특이성이 밝혀
진 것
바 바이러스 항원
: ERA strain 백신주
사. Black goat kidney (BGK) cell
. Biotinylated anti-mouse IgG
용액 제조
PBS 10
Biotinylated anti-mouse IgG 50
와 마혈청
0.1 (1%
되게 를 충분히
혼합한다.
. AB solution
제조
(1) PBS-T
(0.05% Tween-20
함유
PBS)
......................................................
10㎖
(2) A sol. (Avidin DH)
......................................................................... 100㎕
(3) B sol. (Biotinylated HRP H) ..................................................................... 100㎕
. DAB substrate
용액 제조
(1) DAB kit (Vector SK-4000)
사용시
증류수 5 에 다음 시약을 차례로 혼합
Buffer stock (2
방울
DAB stock (4
방울
Hydrogen peroxidase sol. ( 2
방울
4.
검사 방법
가 바이러스 중화시험 및 고정
(1) 96 well plate
에 혈청 비함유 배양액
( -MEM)
50
씩 분주한다.
well
에 불활화시킨 가검혈청
50 를 가하고
2
진 희석한다
(3) Rabies virus (ERA strain) 200 TCID
/50 로 희석하여
well
50
씩 첨가한다
50
) -70
보관중
현재
200
배 희석하여 사용함
진탕기에서
20
초간 진탕하여 완전히 혼합한 다음
, 37
60
분간 배양한다
(5) 20% FBS
함유 배양액에
BGK cell (20
만개
을 희석한 다음
, 100
씩 전
well
에 첨가한다음, 5% CO
배양기에서
2
일간 배양
2
-3-1-2

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