총 180페이지

(6) 2
일간
48
시간 배양 후 배양상층액을 버리고
, PBS
1
회 세척한 다음
plate
를 완전히 건조시킨다
(7) 80% cold acetone
100 씩 전
well
에 가하고
-20
10
분간 두어 고정한다
고정액을 완전히 비우고
, PBS
1
회 세척한다
. Kit
를 사용한 검출 및 판독
(1) Rabies monoclonal antibody (MAB)
2%
마혈청 포함한
로 희석 현재
2,000
배 한 다음
, well
100 씩 가하고
37
에서
60
분간 반응시킨다
(2) PBS
3
4
회 세척한다
(3) Biotinylated anti-mouse IgG
용액을
well
25 씩 분주한다.
(4) 37
에서
40
60
분간 반응시킨다
주 이 때
AB sol.
을 만들어
30
60
분간 미리 반응시킨다
(5) PBS
4
회 세척한다
미리 제조한
AB sol.
well
50 씩 넣고
37
에서
40
60
분간 반응시킨다
(7) PBS-T
3
회 세척한 다음
, PBS
1
회 더 세척한다
용액을 완전히 제거한다
주 종이타올을 탁자에 깔고
plate
를 두드려 완전히 습기를 제거한다
(9) DAB substrate
용액을
well
100 씩 전
well
에 가하여
2 10
분간 반응시킨 다
음 증류수로 세척
(5 )
분 한 후 판독한다
5.
판정기준
혈중항체에 의해 바이러스가 중화된
well (
즉 항체양성 은 세포가 염색되지 않으
나 광견병에 대한 항체가 존재하지 않거나 아주 적은 양이 있을 경우는 진한 갈
색으로 염색됨
항체가는 염색이 확인되지 않는 최고 희석배수의
well
에 해당하는 희석배수로
표현하며 기본적인 내용은
sperman-karver
법에 따른다
Ⅲ-3-1-3
-3-1-3

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