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석하여
RP(relative potency)
1.0
이상이어야 한다
사 검정의 반복
....
“ ”
“ ”
반복한다.
<
1> ELISA Method for Antibody detection
1.
항원이 코팅된
96 well plate
를 사용한다
2. Blocking buffer (PBST : 0.15M PBS + 0.15% Tween 20 + 0.5% Skim milk)
㎕씩 첨가한 후
well
350
25 30°C
에서 최소
30
분 이상 반응한다
3. Blocking buffer
제거 후
serum dilution buffer (0.15M PBS + 0.15% Tween 20)
㎕ 씩 분주하고
well
100
1
12
번까지를
negative control
로 하며
reference standard serum
1
번부터
6
6
에서
까지
2
진 희
석하고 검사혈청에 대해서도
7
번부터
12
열까지
6
에서
까지
2
희석하여
25 30°C
에서
30
분간 반응한다
4.
반응액을 제거하고
washing buffer(0.15M PBS + 0.05% Tween 20)
로 회 세척한
3
serum dilution buffer
goat anti-horse(IgG) conjugate
5,000
배로 희석하여
㎕ 씩 분주하고
well
100
25 30°C
에서
30
분 반응한다
㎕ 씩 첨가하여
5. Washing buffer
6
ABTS substrate
를 전
well
100
25 30°C
에서
30
분간 반응 후
405
에서 흡광도 값을 측정한다
- 953 -
3-5-18-01

953페이지 본문끝



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