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하고 7일간 관찰한다. 관찰기간동안 이상 없이 생존하여야 한다.
연
2) 기니피그 : 체중 300∼350g의 기니피그 4마리를 준비하여, 2마리의 기니피그 근육 또는
구
피하에 2㎖를, 다른 2마리의 기니피그 복강에 2㎖를 접종하고 7일간 관찰한다. 관찰기간
성
동안 이상 없이 생존하여야 한다.
과
3) 돼지 : 체중 8∼10㎏(4∼6주령)의 건강한 돼지 2마리에 백신의 2두분을 근육 접종한다. 접종
활
후 1∼2시간 내에 과민반응이 없어야 하며, 21일간의 관찰하는 동안 주사부위의 화농, 괴사,
용
발열 및 설사 등의 부작용이 없어야 한다.
집
사. 혈청 역가시험
1) 동 물
체중 300∼350g의 기니피그 10마리를 사용한다.
2) 시 험
8마리의 기니피그에 1.0㎖씩 근육 주사하고 3주후에 다시 1.0㎖씩 접종한 후 2주 후에 대조
군 2마리와 함께 채혈하여 돼지 유행성설사바이러스에 대하여 중화 항체가를 측정한다.
3) 시험방법
가검 혈청을 56℃ 30분간 비동화한 후 0.05㎖의 혈청을 96 well microplate에 넣고 세포
유지용 배양액으로 2진 희석한다. 중화용 유행성설사 바이러스(200 TCID50/0.1㎖)액을 동량
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혼합하여 37℃에서 60분간 감작시킨 후 2.0×10
cells/㎖로 조정된 Vero 세포 0.1㎖를 넣어
37℃에서 7일간 배양하여 관찰한다. 매일 현미경으로 관찰하여 CPE에 의한 양성과 음성을
판정한다. 혈청역가는 CPE를 저지한 최고혈청 희석배수의 역수를 역가로 나타낸다.
4) 판 정
돼지 유행성설사바이러스에 대한 항체가는 접종동물의 80% 이상이 8배 이상이어야 한다.
아. 검정의 반복
??가??항에서 ??사??항까지의 시험에서 그 결과를 판정하기 곤란할 때는 해당시험을 반복한다.
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