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과제분류
중 점 과 제
표
과제코드
표준기술활용
B-AD20-2010-11-02
준
National Guideline(NG)
기술코드
AD004-19-22
기
제안부서 세균질병과 기생충?곤충질병연구실
술
1. 과 제 명
토종벌 낭충봉아부패병 방제에 관한 연구
활
2. 제
목
꿀벌 Israeli acute paralysis virus PCR진단법
용
3. 연 구 원
성 명
직 급
과(부서)
연 구 실(팀)
참여율(%)
기생충?곤충질병연구실
a. 주담당자
강승원
수의연구관
세균질병과
30
기생충?곤충질병연구실
b. 담 당 자
최세은
수의연구사
세균질병과
20
노진형
수의연구사
세균질병과
기생충?곤충질병연구실
20
기생충?곤충질병연구실
N.Lien
책임연구원
세균질병과
10
진영화
수의연구관
세균질병과
바이오나노연구실
10
고경봉
과 장
연구기획과
과 장
10
4. 표준기술 활용사항
? 꿀벌 바이러스성 질병(이스라엘 급성 마비병)의 유전자 진단법으로 활용
5. 표준기술 내용요약
? 시험방법
가. 재료 : 이스라엘 급성 마비병에 감염되었거나 의심되는 꿀벌, 애벌레 등 시료, RNA
추출키트, One step RT-PCR 키트, 프라이머
나. 프라이머 제작
Name
Primer sequence(5' →3')
size(bp)
Forward 5`-GAT TTG AGA GAT GTA TTT CCT TCT GCG G-3`
IAPV
725
Reverse 5`-ACA CTT GCG TTG GTC CTG AAT GTT AAT GG-3`
다. 방법
1) RNA 추출키트를 이용하여 시료로부터 RNA를 분리한다.(200㎕)
2) 추출한 RNA로 one step RT-PCR 키트를 이용하여 RT-PCR을 실시한다.
3) RT-PCR 조건
Step
Temp/Time
Cycle
Initial reaction
95℃, 3min
1 cycle
Denaturation
95℃, 30sec
Annealing
52℃, 30sec
34 cycles
Extension
72℃, 60sec
Final Extension
72℃, 5min
1 cycle
4) 판독
- 1.5% Agarose gel에서 전기영동을 실시하여 증폭산물을 확인 후 판독한다.
6. 색인용어 꿀벌 바이러스성 질병, 이스라엘급성마비병, 유전자 검출, 진단
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