총 2151페이지

과제분류
중 점 과 제
연
과제코드
표준기술활용
B-AD20-2010-11-02
구
National Guideline(NG)
기술코드
AD004-19-22
성
과
제안부서 세균질병과 기생충?곤충질병연구실
활
1. 과 제 명
토종벌 낭충봉아부패병 방제에 관한 연구
용
2. 제
목
꿀벌 기문응애의 PCR진단법
집
3. 연 구 원
성 명
직 급
과(부서)
연 구 실(팀)
참여율(%)
a. 주담당자
강승원
수의연구관
세균질병과
기생충?곤충질병연구실
30
기생충?곤충질병연구실
b. 담 당 자
최세은
수의연구사
세균질병과
20
기생충?곤충질병연구실
노진형
수의연구사
세균질병과
20
기생충?곤충질병연구실
N.Lien
책임연구원
세균질병과
10
진영화
수의연구관
세균질병과
바이오나노연구실
10
고경봉
과 장
연구기획과
과 장
10
4. 표준기술 활용사항
? 꿀벌 기생성 질병(기문응애)의 유전자 진단법으로 활용
5. 표준기술 내용요약
? 시험방법
가. 재료 : 기문응애에 감염되었거나 의심되는 꿀벌, 애벌레 등 시료, DNA 추출키트, PCR
키트, 프라이머
나. 프라이머 제작
Name
Primer sequence(5' →3')
size(bp)
Forward 5`-CAG TAG GGC TAG ATA TCG ATA CCC GAG CTT-3`
Acar
247
Reverse 5`-TGA GCT ACA ACA TAA TAT CTG TCA TGA AGA-3`
다. 방법
1) DNA 추출키트를 이용하여 시료로부터 DNA를 분리한다.(200㎕)
2) 추출한 DNA로 PCR 키트를 이용하여 PCR을 실시한다.
3) PCR 조건
Step
Temp/Time
Cycle
Initial reaction
94℃, 5min
1 cycle
Denaturation
98℃, 10sec
Annealing
55℃, 30sec
34 cycles
Extension
68℃, 30sec
Final Extension
68℃, 30sec
1 cycle
4) 판독
- 1.5% Agarose gel에서 전기영동을 실시하여 증폭산물을 확인 후 판독한다.
6. 색인용어 꿀벌 기생충성 질병, 꿀벌 기문응애, 유전자 검출, 진단
380

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