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과제분류
기 본 과 제
연
과제코드
표준기술활용
N-1541781-2008-19-01
구
성
National Guideline(NG)
기술코드
AD005-13-22
과
제안부서 조류질병과 조류인플루엔자연구실
활
1. 과 제 명
야생조류(철새)의 고병원성 조류인플루엔자 감염실태 조사 연구
용
집
조류인플루엔자 바이러스의 유전자중합효소(PB2, PB1, PA) 유전자 전체
2. 제
목
염기서열 분석용 프라이머 제작 및 실험과정 표준화
3. 연 구 원
성 명
직 급
과(부서)
연 구 실(팀)
참여율(%)
a. 주담당자
최준구
수의연구사
조류질병과
조류인플루엔자연구실
25
b. 담 당 자
이윤정
수의연구관
조류질병과
조류인플루엔자연구실
20
강현미
수의연구사
조류질병과
조류인플루엔자연구실
20
김광일
수의연구사
조류질병과
조류인플루엔자연구실
15
송병민
수의연구사
조류질병과
조류인플루엔자연구실
15
이희수
과 장
조류질병과
조류질병과
5
4. 표준기술 활용사항
? 조류인플루엔자 바이러스의 유전자중합효소(PB2, PB1, PA) 유전자 전체 염기서열 분석용
프라이머 제작 및 실험과정 표준화
5. 표준기술 내용요약
? 조류인플루엔자 바이러스 3종의 유전자중합효소(PB2, PB1, PA) 유전자 전체 염기서열
분석용 프라이머 작성
- 조류인플루엔자 유전자 데이터베이스에서 유럽 및 아시아 지역 유래, 2000년도 이후 분리
바이러스의 150-300개 바이러스 유전정보를 바탕으로 100-200bp 부분이 겹치도록 염기
서열 분석용 프라이머 작성(유전자별 4종, 총 12종)
? RT-PCR을 이용한 각 유전자 증폭 조건 확립 및 제작된 프라이머를 이용한 유전자 전체
염기서열 분석
- 조류인플루엔자 바이러스의 유전자중합효소 PB2, PB1, PA는 2.2-2.3kb 크기로 전체 유
전자를 한번에 증폭하기가 용이치 않으므로 2개의 분절로 나누어 증폭(증폭조건 확립)
- 각각의 증폭된 분절을 추출한 후 제작된 각각의 유전자에 특이적인 프라이머를 이용하여
염기서열 분석
- 염기서열 분석용 프로그램을 사용하여 분석된 서열을 조립(assemble)하여 각 유전자별
전체 유전자 염기서열 완성
6. 색인용어 조류인플루엔자 바이러스, 중합효소유전자, 염기서열분석
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