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- S1 항혈청 생산
연
○ 영국 수의연구청에 국내 생산 프리온 특이 단클론항체에 대한 면역조직화학염색법 및 면역
구
블로팅법 적용시험을 통한 진단항체로써의 가능성 확인된 항체 선발(2008년)
성
- 면역조직화학염색법 : BL391 및 8E74항체
과
- 면역블로팅법 : 8E74 및 S1항체
활
○ 스크래피 진단에 있어 조직내 변형프리온을 신속진단(항원 ELISA), 면역조직화학염색법 및
용
면역블로팅법에 국내 생산된 단클론항체 및 항혈청을 활용한 스크래피 진단액 및 진단법의
집
표준화
○ 시약의 구성
1) 신속검사(항원 ELISA) TeSeE ELISA(시판 킷트, Bio-Rad)
2) 면역조직화학염색법
- 1X anti-prion Monoclonal antibody(Mab) : 항체 클론명(BL391, 8E74), 시판항체(F99,
VMRD)
3) 면역블로팅법
- 1X anti-prion Monoclonal antibody(Mab) : 항체 클론명(8E74), 시판항체(6H4,
Prionics)
- 1X rabbit prion antiserum : S1
4) PMCA-WB법 : PMCA buffer, 정상뇌조직 등
○ 검사방법
1) 신속검사(항원 ELISA) TeSeE ELISA
- 검사에 사용할 조직준비 : 20% 뇌유제액, 10% 인두후 림프절
- 전처리(PK 전처리 후 변형프리온 농축)후 ELISA 수행
2) 면역조직화학염색법
- 검사에 사용할 조직 준비 : 포르말린 고정 파라핀 포매조직 두께 : 2㎛
- 88% formic acid 및 고압멸균기를 이용한 항원노출화 과정(121℃ 30분)을 통하여 항원
노출
- 1X anti-prion Monoclonal antibody(Mab)항에 : BL391을 1 : 500, 8E74는 1 : 300,
F99는 1 : 250으로 희석사용
- 자동화면역염색기 이용
3) 면역블로팅법
- 검사에 사용할 조직준비 : 10% 뇌유제액
- 1X anti-prion Monoclonal antibody(Mab)항에 : S1을 1㎍/㎖, 8E74을 2㎍/㎖, 6H4
0.2㎍/㎖로 희석사용
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