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F99는 VMRD에서 생산된 단클론항체로서 냉동상태로 1.0mg/㎖(PBS + 4mg/㎖ BSA +
0.09% sodium azide)의 농도로 공급된다. BL391은 농림수산검역검사본부에서 생산된 항체로
연
구
냉동보관하며 이들 항체의 보관은 -80℃에 최소 50㎕씩 분주하여 보관한다. 전염성해면
성
상뇌증 진단을 위해 농림수산검역검사본부는 F99 1/200, BL391 1/1000 또는1/500농도로
과
희석하여 사용한다. 처음 녹인 이후에 남은 용액은 10㎕씩 분주하여 -20℃에 보관한다
활
(F99의 경우 한번에 20개의 slide를 실시할 수 있으며 2㎖의 용량이 필요하며 10㎕가 소요됨).
용
집
○ 시약 및 시약제조 방법
시약
제조방법
Formic Acid 98%(JUNSEI Co.)
희석하지 않은 농축된 시판시약
Epitope Demasking
DAKO ChemMate Target Retrieval solution buffer
solution(ChemMate
제조사의 유효기간까지 4℃에서 보관
Target Retrieval solution : 0.01mol/L
사용 전에 증류수로 1 : 10으로 희석하여 사용함
Citrate buffer pH 6)
Fresh 3% Hydrogen Peroxide in Methanol
Endogenous Peroxidase Block
(30% Hydrogen Peroxide을 1 : 10으로 희석하여 사용
Cat No. Applicam A1134.0500, 4℃ 보관)
Trizma HCl(29.8g) + 증류수(2) + Triton-X100(10㎖)
Tris Buffered Saline- TritonX-100(TTB)
4℃에서 6개월간 보관가능
3% Normal Horse Serum(Gibco 16050-122, Aliquoted 50㎖
일차항체 희석액
at -20℃)을 TTB로 희석한 용액
만들어진 시약은 4℃에서 2개월간 사용가능
Ventana ultraview Red kit(250 heads/kit)
25㎖ AP Red Enhancer, 25㎖ AP Red Multimer
검출시약
25㎖ AP Red Naphthol, 25㎖ AP Red Fast Red A
25㎖ AP Fast Red B
제조사의 유효기간까지 4℃에서 보관
시약 용량(1방울)
유리슬라이드 당 100㎕ 소요
Trizma HCl(29.8g) + D.W.(2ℓ)
Tris Buffer solution(TB)
실온에서 6개월간 보관가능
Reaction buffer(X10)
Ventana, 제조사의 유효기간까지 실온에서 보관
Liquid Cover slip(LCS)
Ventana, 제조사의 유효기간까지 실온에서 보관
Ventana Hematoxylin 25㎖
대조염색
Bluing reagent 25㎖
Ventana, 제조사의 유효기간까지 4℃에서 보관
Ventana, 제조사의 유효기간까지 4℃에서 보관
단백분해효소 1
마우스조직에서 이용시 2배 희석하여 사용한다
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