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표준 기술 활용 기술서


한?일 양국의 야생조류에서 분리된 조류인플루엔자 바
과 제 코 드
과 제 명

이러스 비교 연구 (Studies on surveillance of wild
birds for avian in-fluenza viruses and utilization
( 영 문 )

M-AD15-2008-10-01
of the viruses)


제 목
SYBR Green을 이용한 influenza virus HA, NA 혈청형 동정법
주담당자
수의연구관 소속 조류질병과조류인플루엔자연구실
이윤정 직급
담 당 자
강현미, 최준구, 김민철, 백미라, 권준헌, K. Tsukamoto
1. 현황 및 문제점
? 조류인플루엔자 표준 혈청형 동정법은 전통적으로 표준항혈청을 사용하여 혈구응집
억제반응을 보는 것으로, 표준항혈청이 모두 있어야 하며 혈청형간 비특이 반응도
있어 일부 제한된 실험실에서만 사용 가능한 단점이 있음.
? 또한, 유전자 검출법에 의한 방법의 경우도 많은 종류의 국내유행 바이러스에 적용하
여 primer 및 조건등을 변경해야 우리나라 유행 바이러스 혈청형 동정에 최종 활용가능
2. 연구성과내용
? 국제공동연구를통해 일본 동물위생연구소에서일본 분리주 및 우리나라 분리주의 유
전자를 이용하여 조류인플루엔자 NP, HA 및 NA 유전자를 동시에 검출할 수 있는
SYBR green rRT-PCR법을 개발하였음.
? rRT-PCR용 프리어머는 조류인플루엔자 바이러스의 유라시아 계통 또는 북아메리카 계
통 유전자를 중심으로 이전의 프라이머를 개선하여 민감도를 높여 사용함. (Table 2)
? 개발된 rRT-PCR법으로 일본 분리주 159종에 적용시험 결과 HA 100%, NA 99% 검
출율로 기존 표준항혈청을 이용한 검출율 (HA 45%, NA 74%)에 비해 훨씬 높은 것
으로 나타남. (Table 1)
Table 1. SYBR green rRT-PCR법을 이용한 조류인플루엔자 HA 및 NA 혈청형 동시 검
출법 바이러스 적용 결과
구 분
Subtype
바이러스
rRT-PCR법
HA
H1-H16
159종
159종 (100%)
NA
N1-N9
159종
157종 (99%)
383

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