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3. 3
차년도 변경사항
가 상반기 변경사유
.
1)
현장 중심연구 강화를 위해 차년도에 병성감정시료와 일부 야외감염농장
2
의 가검물에 대한 적용 시험을 통해
PRRS
등과 같은 일부 원인체를 제외
하고는 진단법이 많이 개선됨
2)
실제적으로 야외에서 주로 많이 발생되는 각종 호흡기질병에 대한 원인체
를 추가 시 새로운 어려움에 봉착하여 개선코자 하였음
3)
양돈장
Screen test
용으로 사용하고자 현장 적용법을 개발하고자 모니터
링 농장을 선정하여 비즙 백혈구 폐 림프절 등 시료별 검사를 실시하였으
,
,
,
나 원인체별 및 시료별 다소 차이를 보였음
나 하반기 변경사유
.
1) 6
종 원인체에 대한
primer
변경으로 인한
product band size
변화
:
Multiplex PCR kit(QIAGEN)
이용상반기
(
)
→
Bioneer premix tube
이용하반기
(
)
원 인 체 종류
2
차년도
band size
1
차 수정
2
차 수정
Porcine circo virus
545bp
144bp
Bordetella bronchiseptica
256bp
256bp
Actinobacillus pleuropneumoniae
812bp
396bp
197bp
Pasteurella multocida
455bp
455bp
Porcine parvovirus
없었음
588bp
Mycoplasma hyopneumoniae
847bp
643bp
366bp
PRRS
312bp
96~105bp
305bp
2) Bioneer premix tube
에 대한
test
결과
가) 표준균주
(reference sample)
를 이용한
DNA premix tube single PCR 결과
①
Annealing temperature
조건에 따른 결과
(55 /53.6 /52 )
℃
℃
℃
: 55
℃
조건에서
band
모양이 가장 진하고 두꺼웠음
.
?
95℃
5 min
?
94℃
30 sec
94℃
30 sec
?
55℃
1 min
FirstLast cycle
?
55℃
1 min
38 cycles
?
72℃
2 min
72℃
1 min
3
차년도 하반기에 보다 신속 간편한 실용적인 방법을 찾고자 새로운 진단법인
Bioneer premix tube를 이용한
PCR
법을 병성감정시료인 폐 조직에 적용하였음

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