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농림축산검역검사기술개발사업2013 연구보고서
Ⅳ. 연구결과요약
1. 구제역바이러스 혈청형별(O, A, Asia1형)불활화 kinetics를 측정한 결과, 2mM BEI를 37℃ 조건에서
-7
처리하면 10
TCID50/ml 이하로 8시간 이전에 불활화함.
2. 구제역 백신제조시 최적의 PEG 6000 농도는 7.5%이고 이 조건에서 불활화 바이러스 회수율이
최고조에 달하였고 NSP 잔량은 전무함.
3. 구제역바이러스를 선택적으로 정제하고자 chromatography법으로서 cellufine sulfate column 혹은
3B 에피톱에 특이적인 단클론항체를 agarose resin에 결합시킨 affinity column을 적용한 결과,
불활화 구제역바이러스와 NSP가 일부 중첩되어 추가적으로 세부조건 조정이 필요함.
4. 구제역 백신 생산공정별NSP 잔량을 측정할 수 있는 기법으로서 기존의3ABC-IPC 키트 이용한
기법 확립.
5. 기존 키트를 대체할 수 있는 기법을 개발하고자 검출용 단클론항체를 제작하여 기존 검출용 키트에
사용하는 단클론항체와 반응성을 비교.
6. 구제역바이러스NSP 검출방법으로서 기존의 항원간이키트를 사용하여3B 에피톱 포함한 유전자
재조합NSP 단백질들에 대해서 검출한계를 측정한 결과, 상업화 키트인3ABC-IPC와 대등한 수준을
나타냄.
7. 불활화 구제역바이러스 146S 정량기법 확립.
8. 기존의 불활화 구제역바이러스146S 정량기법 개발 위한 기존 항체 평가.
Ⅴ. 금후 추진계획
1. 바이러스 입자 회수율 평가 위한ELISA 기법 개발(신규과제)
Ⅵ. 연구결과 활용실적 및 계획
활용명
제
목
담당자
비 고
· 구제역바이러스 농축 및 정제방법
이향심외 7인
예정(’14.03)
표준기술활용
계획
· 불활화 구제역바이러스 함량 측정기법
계획 · 구제역바이러스 입자별 특이 항체제작 및 응용
이향심외7인
예정(’14.03)
지식재산권
· 구제역바이러스 최적 농축 및 정제방법
이향심외 7인
예정(’14.03)
논문게재
계획
· 국내분리 구제역바이러스 불활화도 평가
예정(’13.10)
· 구제역바이러스 농축 및 정제기법 비교평가
예정(’13.10)
· 구제역바이러스 입자별 특이 항체제작 및 응용
고영준외 7인
계획
예정(’13.10)
· Chromatography법 이용한 구제역바이러스 정제
학술발표
· 백신주 구제역바이러스 불활화도 평가
완료(’12.10)
· 국내분리 구제역바이러스 불활화도 평가
완료(’13.10)
실적
· 구제역바이러스 농축기법 평가
완료(’13.10)
· 구제역바이러스 백신평가용 세포주 적합성 평가
완료(’13.10)
162 농림축산검역본부

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