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농림축산검역검사기술개발사업 2015 연구보고서
- 돼지열병 생마커백신 후보주(BErns)의 경우 Erns 부분이 BVDV의 Erns와 치환되어 있기 때문에 BVDV
Erns 항체를 검출하는 ELISA의 경우에도 돼지열병 야외 혈청과 생마커백신 혈청을 감별 가능함. 이에
따라 BVDV Erns C-ELISA(생마커백신 검출용 키트) 개발을 진행하였으며 ELISA 조건 설정
3. 진단 키트 평가용 혈청 항체 패널 구축
- 진단 키트 테스트용 혈청 항체 총 68종 (돼지열병 Erns 양성 혈청 32종, 돼지열병 Erns 음성 혈청 36종)을
구축함
- 돼지열병 생마커백신 후보주(BErns)를 자돈 9두에 접종하여 양성항혈청 생산 완료
4. 개발된 항체 진단 키트(DIVA)의 재현성, 정확도, 민감도, 특이도 평가
- 진단 키트용 혈청 항체 패널 68종을 이용하여 개발된 항체 진단키트 평가 수행
- 국내 돼지열병 백신 양성혈청(LOM주) 452두 및 음성혈청 268두를 이용하여 개발된 항체 진단 키트 평가
수행(CSFV Erns C-ELISA, 민감도 90.0%, 특이도 99.3%)
- 생마커백신 검출용 BVDV Erns C-ELISA Kit: 중화항체가 8~16배 이상 양성 검출
- 돼지열병 생마커백신 후보주(BErns) 야외 농장 적용 혈청을 이용한 항체 진단 키트 평가 수행
- Median, Prionic사의 돼지열병 Erns ELISA kit와 민감도, 특이도 비교 평가 수행
5. 항체 감별 진단법 구축
- 돼지열병 생마커백신 후보주(Flc-LOM-BErns) 맞춤형 진단법
1차 검사
2차 정밀 검사
비고
CSFV E2 ELISA CSFV Erns ELISA BVDV Erns ELISA
+
2차 검사 필요없음
-
필요시(+)
생마커
야외주감염혈청/LOM 백신 혈청
+
(역가가 낮은
-
야외주/LOM
경우)
생마커백신 혈청
+
-
필요시(+)
음성 혈청/BVDV 감염혈청
-
-
2차 검사 필요없음
* CSFV E2 양성/Erns 음성의 경우에만 2차 정밀검사 수행
? 제2세부과제명 : 돼지열병 생마커백신 후보주(Flc-LOM-BErns-CYYR1) 맞춤형 진단법(DIVA) 개발
1. 진단 키트용 항원 및 단클론항체 성상 분석
- CYYR1에 대한 단클론항체 7종을 제작하고 재조합 단백질(CYYR1)과의 반응성을 확인하였으며, 최종 ELISA용
CYYR1 재조합 단백질과 단클론항체 선발
- 돼지열병 E2에 대한 단클론항체 29종 중에서 WH303 단클론항체 에피톱을 인식하는 단클론항체 5종을
선발하고 성상 분석
- 돼지열병 진단용 단클론항체(LOM1) epitope 분석
2. 진단 키트 평가용 돼지혈청 항체 패널 구축
- 자돈에 재조합 단백질 CYYR1을 접종하여 항혈청 생산
3. 항체 감별 진단법 구축
- 돼지열병 생마커백신 후보주(Flc-LOM-BErns-CYYR1) 맞춤형 진단법 구축
6. 색인용어
돼지열병, 생마커백신, 항체진단법
2014 ? 2015 (2년)
7. 연구기간
2002
농림축산검역본부

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