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Ⅴ 용역연구 연구보고서
연구결과보고서 요약문
연구과제명
농장 및 도축장 식육 유래 L. monocytogenes 분리 현황 및 분자역학적 분석
중심단어
농장, 도축장, Listeria monocytogenes, 병원성 유전자, 유전적 상관성
자체연구
주관연구기관
숙명여자대학교
주관연구책임자
윤 요 한
보고서
역학조사과
연구기간
2014년 10월 21일 ∼ 2015년 11월 30일
본 연구에서는 국내 농장 환경과 도축장 식육에서의 L. monocytogenes 오염 현황 및 인체 분리
질병진단과
균주의 분석 뿐 아니라 병원성 유전자 분석을 통한 L. monocytogenes의 실태자료 확보, 위해도 분
석 및 오염경로를 분석하기 위하여 농장, 도축장 식육, 인체감염환자로부터 L. monocytogenes 분리
동물보호과
및 병원성 확인과 PFGE를 활용한 유전적 상관성 분석을 통하여 농장, 도축장 및 인체 분리균주 간
동물약품
의 분자역학적 분석을 진행하고, 이를 통하여 국내 L. monocytogenes 분리주들의 위험성 확인 및
관리과
관리방안을 제시하고자 하였다. 도축장 식육에서의 L. monocytogenes 분리주를 분석하기 위하여
동물약품
전국의 도축장을 권역별(중부, 영남, 호남)로 선정하여 9곳의 도축장에서 소와 돼지의 도체, 도체시
평가과
료를 채취한 동일한 개체의 분변 그리고 최종 세척수로부터 채취한 290개의 시료 중 15개(5.17%)의
식물검역
시료에서 L. monocytogenes가 분리되었다. 또한 사전에 도축장으로부터 분리했던 L.
기술개발
센터
monocytogenes 균주 72개를 포함하여 총 87개의 도축장 유래 L. monocytogenes에 대한 병원성
확인과 혈청형 분석을 진행하였다. 인체 분리균주는 대학병원과 질병관리본부로부터 11개의 분리주
연구기획과
를 확보하여 분석을 진행하였다. 농장 환경에서의 L. monocytogenes 분리주 분석을 위해 도축장에
서 L. monocytogenes가 분리되었던 양성농장을 포함한 지역별 농장을 2-3회 이상 방문하여 분변
세균질병과
(677개), 토양(680개), 사일리지(647개)와 슬러지(14개) 시료, 총 2,018개를 분석하였고 3개(0.15%)의
구제역
L. monocytogenes 분리주를 확보하였다. 채취된 시료들은 Listeria Enrichment Broth와 Fraser
진단과
broth 배지에서 증균 과정을 거쳐 PALCAM agar에 획선도말하고 Listeria species의 분리를 확인하였
바이러스
다. PALCAM agar에서 검은 구역을 형성하는 의심집락을 hly와 prs primer를 사용한 PCR 분석을
질병과
통해 L. monocytogenes를 확인하였고, 16s rRNA 분석을 통하여 L. monocytogenes로 재확인하였
다. 분리된 L. monocytogenes에 대하여 병원성 유전자(actA, inlA, inlB, plcB, hlyA) 검사와 혈청형
조류질병과
분류(multiplex-PCR, Listeria antisera)를 통한 위해성 확인과 AscI에 대한 PFGE를 통하여 유전적 상
해외
관성을 분석하였다. 인체 유래 L. monocytogenes의 혈청형은 1/2a(18%), 1/2b(27%), 4b(27%) 등으
전염병과
로 분석되어 식품에서 주로 분리되는 L. monocytogenes 1/2a, 1/2b, 4b가 주로 분리된 것을 확인
서울지역
할 수 있었다. 반면에 도축장 L. monocytogenes의 혈청형은 1/2c(72.4%)가 가장 많았으며,
본부
1/2a(9.2%), 1/2b(13.8%)도 낮은 비율로 존재하였다. 농장에서 분리된 L. monocytogenes는 병원성
용역연구
이 낮은 3a, 4ab로 확인되었다. 또한, 병원성 유전자 검사 결과, 모든 분리주에서 대부분의 병원성
보고서
유전자가 검출되었다. PFGE 분석 결과, 인체 분리균주와 도축장분리주 간의 유전적 상관성이 높은
일부 균주가 확인되었지만 도축장균주와 인체분리주 간의 actA 크기와 혈청형이 다르게 나타났기
때문에 L. monocytogenes가 도축장으로부터 인체감염으로 연결되는 가능성은 낮은 것으로 사료되
고, 농장에서 L. monocytogenes의 분리율이 도축장에 비해 매우 낮고 혈청형도 다르기 때문에 도
체에서 분리된 L. monocytogenes는 농장으로부터 전이되기 보다는 도축장 내의 교차오염에 의해
도체에 오염되는 것으로 사료된다. 따라서, 도축장 내 L. monocytogenes 오염원 확인을 위한 지속
적인 연구가 필요하며 본 연구의 결과는 L. monocytogenes 저감화를 위한 근거자료 및 제어관리
방안제시에 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
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www.qia.go.kr
연구결과보고서 요약문
연구과제명
농장 및 도축장 식육 유래 L. monocytogenes 분리 현황 및 분자역학적 분석
중심단어
농장, 도축장, Listeria monocytogenes, 병원성 유전자, 유전적 상관성
자체연구
주관연구기관
숙명여자대학교
주관연구책임자
윤 요 한
보고서
역학조사과
연구기간
2014년 10월 21일 ∼ 2015년 11월 30일
본 연구에서는 국내 농장 환경과 도축장 식육에서의 L. monocytogenes 오염 현황 및 인체 분리
질병진단과
균주의 분석 뿐 아니라 병원성 유전자 분석을 통한 L. monocytogenes의 실태자료 확보, 위해도 분
석 및 오염경로를 분석하기 위하여 농장, 도축장 식육, 인체감염환자로부터 L. monocytogenes 분리
동물보호과
및 병원성 확인과 PFGE를 활용한 유전적 상관성 분석을 통하여 농장, 도축장 및 인체 분리균주 간
동물약품
의 분자역학적 분석을 진행하고, 이를 통하여 국내 L. monocytogenes 분리주들의 위험성 확인 및
관리과
관리방안을 제시하고자 하였다. 도축장 식육에서의 L. monocytogenes 분리주를 분석하기 위하여
동물약품
전국의 도축장을 권역별(중부, 영남, 호남)로 선정하여 9곳의 도축장에서 소와 돼지의 도체, 도체시
평가과
료를 채취한 동일한 개체의 분변 그리고 최종 세척수로부터 채취한 290개의 시료 중 15개(5.17%)의
식물검역
시료에서 L. monocytogenes가 분리되었다. 또한 사전에 도축장으로부터 분리했던 L.
기술개발
센터
monocytogenes 균주 72개를 포함하여 총 87개의 도축장 유래 L. monocytogenes에 대한 병원성
확인과 혈청형 분석을 진행하였다. 인체 분리균주는 대학병원과 질병관리본부로부터 11개의 분리주
연구기획과
를 확보하여 분석을 진행하였다. 농장 환경에서의 L. monocytogenes 분리주 분석을 위해 도축장에
서 L. monocytogenes가 분리되었던 양성농장을 포함한 지역별 농장을 2-3회 이상 방문하여 분변
세균질병과
(677개), 토양(680개), 사일리지(647개)와 슬러지(14개) 시료, 총 2,018개를 분석하였고 3개(0.15%)의
구제역
L. monocytogenes 분리주를 확보하였다. 채취된 시료들은 Listeria Enrichment Broth와 Fraser
진단과
broth 배지에서 증균 과정을 거쳐 PALCAM agar에 획선도말하고 Listeria species의 분리를 확인하였
바이러스
다. PALCAM agar에서 검은 구역을 형성하는 의심집락을 hly와 prs primer를 사용한 PCR 분석을
질병과
통해 L. monocytogenes를 확인하였고, 16s rRNA 분석을 통하여 L. monocytogenes로 재확인하였
다. 분리된 L. monocytogenes에 대하여 병원성 유전자(actA, inlA, inlB, plcB, hlyA) 검사와 혈청형
조류질병과
분류(multiplex-PCR, Listeria antisera)를 통한 위해성 확인과 AscI에 대한 PFGE를 통하여 유전적 상
해외
관성을 분석하였다. 인체 유래 L. monocytogenes의 혈청형은 1/2a(18%), 1/2b(27%), 4b(27%) 등으
전염병과
로 분석되어 식품에서 주로 분리되는 L. monocytogenes 1/2a, 1/2b, 4b가 주로 분리된 것을 확인
서울지역
할 수 있었다. 반면에 도축장 L. monocytogenes의 혈청형은 1/2c(72.4%)가 가장 많았으며,
본부
1/2a(9.2%), 1/2b(13.8%)도 낮은 비율로 존재하였다. 농장에서 분리된 L. monocytogenes는 병원성
용역연구
이 낮은 3a, 4ab로 확인되었다. 또한, 병원성 유전자 검사 결과, 모든 분리주에서 대부분의 병원성
보고서
유전자가 검출되었다. PFGE 분석 결과, 인체 분리균주와 도축장분리주 간의 유전적 상관성이 높은
일부 균주가 확인되었지만 도축장균주와 인체분리주 간의 actA 크기와 혈청형이 다르게 나타났기
때문에 L. monocytogenes가 도축장으로부터 인체감염으로 연결되는 가능성은 낮은 것으로 사료되
고, 농장에서 L. monocytogenes의 분리율이 도축장에 비해 매우 낮고 혈청형도 다르기 때문에 도
체에서 분리된 L. monocytogenes는 농장으로부터 전이되기 보다는 도축장 내의 교차오염에 의해
도체에 오염되는 것으로 사료된다. 따라서, 도축장 내 L. monocytogenes 오염원 확인을 위한 지속
적인 연구가 필요하며 본 연구의 결과는 L. monocytogenes 저감화를 위한 근거자료 및 제어관리
방안제시에 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
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