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발표된 설명과 일치했습니다(Damm et al. 2012).
분자생물학적인 방법으로 종을 확인하기 위해 내부 전사된 스페이서(ITS),
글리세르알데히드-3-인산 탈수소효소(GAPDH), 액틴(ACT) 및 베타-튜불린(TUB2)
유전자를 증폭하고 프라이머 쌍 ITS1/ITS4를 사용하여 염기서열을 분석했습니다(White
et al. 1990), GDF1/GDR1(Guerber et al. 2003), ACT512F/ACT783R 및
BT2Fd/BT4R(Da Lio et al. 2018). 분리주는 Colletotrichum fioriniae(Marcelino &
Gouli)와 Colletotrichum nymphaeae(Pass)의 두 가지 다른 종인 Colletotrichum
acutatum complex에 속했습니다. 두 가지 대표적인 분리주인 Colletotrichum fioriniae
CREADC-F2317 및 Colletotrichum nymphaeae CREADC-F2372의 서열은 수탁 번호
MZ153170 및 MZ191794(ITS), MZ203522 및 MZ203522 및 MZ224013(GAPDH)으로
GenBank에 기탁되었습니다. 모든 유전자에 대해 분리주는 각각 여러 Colletotrichum
fioriniae 및 Colletotrichum nymphaeae와 100% 유사성을 보였습니다.
MEGA 6.0(Tamura et al. 2013)을 사용하여 4개 유전자의 연결된 시퀀스를 기반으로
하는 최대 가능성 트리를 구성했습니다. 계통발생학적 분석은 분리주를 각각
Colletotrichum fioriniae 및 Colletotrichum nymphaeae 군집으로 분류하였습니다. 두
가지 분리주 CREADC-F2317 및 CREADC-F2372를 사용하여 호두 열매에 대한
병원성을 확인했습니다. 품종 Lara의 열매를 3% NaOCl에 1분간 담가 표면 소독하고
멸균 증류수로 헹구고 멸균 습한 챔버에 배열했습니다. 과일을 멸균 바늘로 상처를 낸
다음 각 분리주의 106 분생포자/ml 현탁액 20 μl를 접종했습니다 (과일당 하나의
상처). 멸균 증류수로 처리한 과일이 대조군으로 사용되었습니다. 접종은 복제당 3개의
과일에 대해 수행되었고 완전한 무작위 블록 디자인으로 배열된 처리당 3개의
복제물에 대해 수행되었습니다. 25 ± 1°C에서 7일 동안 배양한 후, 접종된 모든
과일은 전형적인 탄저병 증상과 크림색에서 연어 핑크색 쐐기풀을 동반한 병변을 보인
반면 대조군은 건강하게 유지되었습니다. Colletotrichum nymphaeae 및 Colletotrichum
fioriniae 종은 썩은 과일에서 다시 분리되었습니다. 병원성 테스트는 동일한 결과로 두
번 반복되었습니다. 재분리된 균류의 형태는 접종된 균류와 일치하여 Koch의 가정을
충족했습니다.
Colletotrichum fioriniae 및 Colletotrichum nymphaeae 종은 전 세계적으로 수많은
종에 영향을 미치는 것으로 설명되었습니다 (Damm et al. 2012). Colletotrichum
fioriniae와 Colletotrichum nymphaeae는 이전에 호두에 심각한 탄저병을 일으키는
것으로 보고되었습니다: 프랑스의 Colletotrichum fioriniae(Da Lio et al. 2018)와
헝가리(Varjas et al. 2019), et al. 2018) 및 브라질(Savian et al. 2019). 우리가 아는
한, 이것은 이탈리아에서 호두 탄저병의 원인 인자로서 Colletotrichum fioriniae와
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분자생물학적인 방법으로 종을 확인하기 위해 내부 전사된 스페이서(ITS),
글리세르알데히드-3-인산 탈수소효소(GAPDH), 액틴(ACT) 및 베타-튜불린(TUB2)
유전자를 증폭하고 프라이머 쌍 ITS1/ITS4를 사용하여 염기서열을 분석했습니다(White
et al. 1990), GDF1/GDR1(Guerber et al. 2003), ACT512F/ACT783R 및
BT2Fd/BT4R(Da Lio et al. 2018). 분리주는 Colletotrichum fioriniae(Marcelino &
Gouli)와 Colletotrichum nymphaeae(Pass)의 두 가지 다른 종인 Colletotrichum
acutatum complex에 속했습니다. 두 가지 대표적인 분리주인 Colletotrichum fioriniae
CREADC-F2317 및 Colletotrichum nymphaeae CREADC-F2372의 서열은 수탁 번호
MZ153170 및 MZ191794(ITS), MZ203522 및 MZ203522 및 MZ224013(GAPDH)으로
GenBank에 기탁되었습니다. 모든 유전자에 대해 분리주는 각각 여러 Colletotrichum
fioriniae 및 Colletotrichum nymphaeae와 100% 유사성을 보였습니다.
MEGA 6.0(Tamura et al. 2013)을 사용하여 4개 유전자의 연결된 시퀀스를 기반으로
하는 최대 가능성 트리를 구성했습니다. 계통발생학적 분석은 분리주를 각각
Colletotrichum fioriniae 및 Colletotrichum nymphaeae 군집으로 분류하였습니다. 두
가지 분리주 CREADC-F2317 및 CREADC-F2372를 사용하여 호두 열매에 대한
병원성을 확인했습니다. 품종 Lara의 열매를 3% NaOCl에 1분간 담가 표면 소독하고
멸균 증류수로 헹구고 멸균 습한 챔버에 배열했습니다. 과일을 멸균 바늘로 상처를 낸
다음 각 분리주의 106 분생포자/ml 현탁액 20 μl를 접종했습니다 (과일당 하나의
상처). 멸균 증류수로 처리한 과일이 대조군으로 사용되었습니다. 접종은 복제당 3개의
과일에 대해 수행되었고 완전한 무작위 블록 디자인으로 배열된 처리당 3개의
복제물에 대해 수행되었습니다. 25 ± 1°C에서 7일 동안 배양한 후, 접종된 모든
과일은 전형적인 탄저병 증상과 크림색에서 연어 핑크색 쐐기풀을 동반한 병변을 보인
반면 대조군은 건강하게 유지되었습니다. Colletotrichum nymphaeae 및 Colletotrichum
fioriniae 종은 썩은 과일에서 다시 분리되었습니다. 병원성 테스트는 동일한 결과로 두
번 반복되었습니다. 재분리된 균류의 형태는 접종된 균류와 일치하여 Koch의 가정을
충족했습니다.
Colletotrichum fioriniae 및 Colletotrichum nymphaeae 종은 전 세계적으로 수많은
종에 영향을 미치는 것으로 설명되었습니다 (Damm et al. 2012). Colletotrichum
fioriniae와 Colletotrichum nymphaeae는 이전에 호두에 심각한 탄저병을 일으키는
것으로 보고되었습니다: 프랑스의 Colletotrichum fioriniae(Da Lio et al. 2018)와
헝가리(Varjas et al. 2019), et al. 2018) 및 브라질(Savian et al. 2019). 우리가 아는
한, 이것은 이탈리아에서 호두 탄저병의 원인 인자로서 Colletotrichum fioriniae와
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