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중합효소 연쇄 반응(PCR) 증폭 (Kim et al. 2014)은 Primus 96 열 순환기(MWG
Biotech, Germany)에서 내부 전사된 스페이서(ITS) 영역(White et al. 1990)에 대한
프라이머 ITS1/ITS4를 사용하여 수행되었습니다. 특정 PCR은 프라이머
SSasprF/SSasprR로 수행되었습니다(Abd-Elmagid et al. 2013). PCR 산물은
Microsynth Austria GmbH에 의해 시퀀싱되었습니다. 440-bp ITS 서열(GenBank
MW012403.1)의 NCBI BLAST 분석은 S. sclerotiorum(MT177267.1 등)의 서열과
100% 동일성을 나타냈다. 170-bp 특이적 유전자 서열(GenBank MW959042.1)은
가상 단백질(GenBank MK028159.1)과 100% 유사성을 가졌고 S. sclerotiorum
aspartyl protease 유전자(AF271387.1)의 일부와 99.4% 유사성을 보였습니다. 병원성
시험은 표면 소독된 30일 된 물냉이 식물을 플라스틱 화분(15 × 15 × 12 cm)에
접종하여 수행했습니다. 세 번의 반복 실험에서 90개의 물냉이 식물이 측정되었습니다.
15개의 식물(포트당 1개의 식물)을 5회 고압멸균된 기질(Biorgmix: pH 6.1 ± 0.5%;
N, 1.5%; P2O5, 0.7%; K2O, 0.5%; 유기물 함량, 50%)에 심고 S.
sclerotiorum(Scl_B)에 의해 식민지화된 10개의 밀 커널에 의해
접종되었습니다(Garibaldi et al. 2019). 대조군으로 10개의 접종되지 않은 낟알과 함께
15개의 식물을 기질에 심었다. 식물은 12시간 명암 주기로 21 ± 1°C의 MLR-352
기후 테스트 챔버(PHCbi, 일본)에 보관되었습니다. 실험 첫날 복합양액(Tek-Land: N,
5%; P2O5, 5%; K2O, 5%; B, 0.01%; Cu, 0.01%; Mn, 0.02%; Mo, 0.002%) ; Zn,
0.016%)를 사용한 다음 매일 고압멸균수를 사용했습니다. 8일 후에는 접종된 모든
식물에 백색 균사체가 나타났고, 5일 후에는 줄기에 흑색 균사체가 형성되었다.
형태학적 특성에 따라 재분리된 병원체는 S. sclerotiorum이었습니다. 45개의 감염된
물냉이 식물에서 모두 재분리된 흰곰팡이 곰팡이에 대한 3회의 반복 실험에서 유사한
결과가 감지되었습니다. 접종하지 않은 45개 식물은 아무런 증상과 질병을 나타내지
않았습니다.
이것은 헝가리의 아쿠아포닉 시스템에서 물냉이에 흰색 곰팡이 균핵균이 처음 보고된
사례입니다.
3. 원 문
First Report of Sclerotinia sclerotiorum on Watercress (Nasturtium officinale) in an Aquaponic
System in Hungary
Kitti Csullog, Brigitta Toth, Eva Judit Lelesz, Milan Feher, Csaba Istvan Virag, Erika Kutasy,
Brigitta Jasz, Gabor Tarcali, and Gyorgyi Biro
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