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정제하고 감자 덱스트로스 한천과 카네이션 잎 한천에서 배양하여 형태학적으로
특성화했습니다. Fusarium spp.와 유사한 형태학적 특성을 가진 16개의 분리주가
확인되었습니다.
분자생물학적인 방법으로 종을 확인하기 위해 번역 신장 인자 1-α 유전자(TEF1)를
사용하여 확인했습니다(O'Donnell et al. 2015). TEF1은 프라이머 쌍
EF1/EF2(O'Donnell et al. 1998) 또는 Fa/Ra(Edel-Hermann et al. 2015)로 증폭되고
시퀀싱되었습니다. GenBank 등록 번호는 MW694287에서 MW694302입니다. BLAST
검색은 균주 MIAE07688, MIAE07689, MIAE07690 및 MIAE07691의 서열이
F.avenaceum의 서열과 100% 유사성을 갖고 F.avenatic 증상에서 수집된 Canada의
KU587615 서열과 98.6 내지 100% 유사성을 가짐을 보여주었습니다. 균주
MIAE07692, MIAE07693, MIAE07694 및 MIAE07695의 서열은 영국에서 증상이 있는
완두콩(수탁 번호 MT630325, MT26, MT6)에서 수집한 F. oxysporum의 서열과 100%
유사성을 가졌습니다. 균주 MIAE07696, MIAE07697, MIAE07698 및 MIAE07699의
서열은 F. redolens의 서열과 100% 유사성을 보였고, 캐나다 증상이 있는 완두콩에서
채취한 F. redolens의 서열 KU587620과 99.3 내지 99.5% 유사성을 나타냈다. 균주
MIAE07700, MIAE07701, MIAE07702 및 MIAE07703의 서열은 F. solani의 서열과 99
내지 100% 유사성을, F. pisi comb의 서열 KY556458과 99.7 내지 100% 유사성을
나타내었다.
병원성을 평가하기 위해 표면 멸균된 완두콩 종자(cv. Firenza)를 맥아 한천에 놓고
48시간 후 발아된 종자를 1.6g/리터의 Hoagland의 No. 2 기본 염 혼합물 20ml를
함유한 멸균 유리관으로 옮겼습니다. 8g/리터의 한천에서 발아 후 5일에 105
분생자/ml의 분생자 현탁액 1ml 또는 대조군 묘목을 위한 멸균 탈이온수를
접종하였습니다. 균주당 8개의 튜브와 8개의 대조군 튜브를 준비했습니다. 튜브를 25
및 23°C(각각 낮과 밤)의 성장 챔버에서 30일 동안 16시간의 빛과 8시간의 어둠
속에서 인큐베이션했습니다. 대조군 묘목은 무증상이었습니다. 4개의 F. avenaceum
균주는 뿌리에 갈색 썩음 증상을 일으키고 공기 부분의 시들음으로 인해 62-100%
죽은 묘목이 발생했습니다. 4개의 F. oxysporum 균주는 뿌리에 변색된 갈색 증상을
일으키고 공기 부분의 시들음을 유발하여 100% 사망을 초래했습니다. 4개의 F.
redolens 계통은 뿌리에 꿀색에서 갈색 증상을 일으키고 공기 부분이 시들게 하여
묘목이 75~100% 죽었습니다. 마지막으로, 4개의 F. solani 균주는 줄기의 기저부까지
전체 뿌리 시스템에 갈색에서 검은색 썩음 증상을 유발하여 100% 사망을
초래했습니다. 감염된 식물로부터 재분리된 균주는 접종된 균주와 동일한 형태학적
특성을 가졌다.
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