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표 1. 표준혈청중화시험법(FAVNT) 개요
시험 단계
시험 방법
비고
혈청 희석배수(반복수)
3진 희석(4줄 반복)
표준혈청도 동일 희석
바이러스(역가)
CVS-11(100TCID50/50ul)
2일 배양된 CVS-11
중화시간
1시간
4
세포(세포수)
BHK-21(2×10
/50ul)
응집이 없는 3일 배양세포
배양시간
48시간
37℃, 5% CO2
고정(시간)
80% 아세톤(10분)
건조후 고정(PBS 세척은 생략)
형광물질 부착 광견병 뉴클레오단백질 특이
단크론 항체 반응은 형광물질 부착
바이러스확인(염색)
단크론 항체
항마우스항체 반응도 가능
각 혈청 역가의 D50(median dose)을 산출한
D50은 Spearman-Karber 공식이나
역가 계산
후 표준혈청역가의 상대 역가로 계산
neoprobit graphic 방법을 이용
판정
0.5 IU/ml이상
역가 미달인 개체는 백신 재접종
그림 1. 바이러스 감염 세포 염색 사진
표 2. 국내 제작 표준 혈청
제작 항혈청
기원
상태
최종 역가(IU/ml)
개 혈청
백신 접종 고역가 개혈청
비정제
10.2
사람 혈청
사람 치료용 면역혈청
정제
6.0
단크론 항체
중화능이 있는 마우스 항체
정제
4.6
2) 표준시험법에 대한 국제 인증 획득
가. 광견병 항체검사의 신뢰성을 높이기 위하여 OIE 광견병 표준 실험실인 프랑스 AFSSA
Nancy에서 엄격한 테스트를 거쳐 국제공인기관을 인증하고 있으며, 검역원에서는 본
표준중화시험법에 대한 인증을 획득함
나. 광견병 혈청검사 국제 인증관련 연례 능력시험에서 표준혈청중화시험법을 이용하여 능력
시험에 통과함
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