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된 콜로니는 SPA에서는 크림색이었고 KB에서는 무형광이었습니다. 두 개의 분리물인
1-KB와 3A는 프라이머 D21과 D22를 사용하여 16S rRNA와 23S rRNA 사이의 내부
전사 스페이서(ITS1)를 증폭하여 처음으로 확인되었습니다(Manceau and Horvais
1997). 얻은 550bp PCR 산물을 정제하고 서열을 분석했습니다. 후속 BLAST 검색에
서는 서열이 이탈리아의 토마토에서 분리된 균주 DSM 16733(수탁 번호 LT629790.1)
과 100% 동일성을 갖고 미국의 토마토에서 분리된 균주 SM664-12(acc. NCBI의
Pseudomonas mediterranea의 KC405207.1)입니다. 분리물 3A에 대한 ITS 서열은
GenBank에 등록 번호 2로 기탁되었습니다. OP765279. P. mediterranea에 대한 종-
특이적 프라이머 PC1/1-PC1/2를 사용하여 추가 식별을 수행했습니다(Catara et al.
2000, 2002). 600-bp DNA 단편의 증폭으로 분리된 1-KB와 3A가 P. mediterranea라
는 것이 확인되었습니다. 이 지역의 경우, 분리된 3A의 서열이 GenBank에 acc. 아니
요. OP068273. 바이오 챔버의 화분에서 자란 토마토 식물(품종 Moneymaker)에 대해
병원성을 평가했습니다. 식물은 8잎 단계(BBCH 18)까지 25/20°C 12/12h 암/밝기 체
제에서 재배되었습니다. 접종에는 Pseudomonas mediterranea 분리주 3A를 사용했습
니다. KB 배지에서 48시간 동안 성장시킨 분리물로부터 접종원을 제조하고 희석 플레
이트 수에 따라 멸균 증류수(농도 109 CFU ml-1)에 현탁시켰습니다. 10개의 식물에
10μl의 박테리아 현탁액을 주사기로 줄기에 주입하여 접종했습니다. 5개의 대조 식물에
멸균 증류수를 접종했습니다. 식물 성장 40일 후, P. mediterranea 분리주 3A를 접종
한 모든 식물에서 증상이 나타났습니다. 시들음은 관찰되지 않았고 모든 식물이 살아
있었지만, 윗잎에서는 백화현상이 관찰되었고, 중간잎에서는 백화현상과 괴사가 관찰되
었으며, 기부잎은 시들었다. 줄기의 세로 단면에서는 접종 지점에서 세로 방향의 물 구
덩이가 퍼져 있는 갈색 고과 조직이 드러났습니다. 대조 식물에서는 증상이 관찰되지
않았습니다. 가장 심각한 증상을 보이는 3개 식물에서 재분리된 박테리아는 종특이적
프라이머 쌍 PC1/1-PC1/2를 이용하여 원본과 동일한 것으로 입증되었습니다.
우리가
아는 한, 이것은 크로아티아에서 토마토줄기속썩음병을 일으키는 P.
mediterranea가 처음으로 확인된 것입니다. P. mediterranea에 의한 토마토 속 괴사는
크로아티아 온실 토마토의 중요한 세균성 질병이 될 수 있습니다.
3. 원 문
First Report of Pseudomonas mediterranea Causing Tomato Pith Necrosis in Croatia
Dario Ivi?, Adrijana Novak, Jelena Plavec, Renata Ili?i?, and Tatjana Popovi? Milovanovi?
In May 2021, a tomato producer reported an occurrence of a previously unknown disease in a
greenhouse near Split, Croatia. About 30% of plants (cultivar Signora) were affected. Symptoms
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1-KB와 3A는 프라이머 D21과 D22를 사용하여 16S rRNA와 23S rRNA 사이의 내부
전사 스페이서(ITS1)를 증폭하여 처음으로 확인되었습니다(Manceau and Horvais
1997). 얻은 550bp PCR 산물을 정제하고 서열을 분석했습니다. 후속 BLAST 검색에
서는 서열이 이탈리아의 토마토에서 분리된 균주 DSM 16733(수탁 번호 LT629790.1)
과 100% 동일성을 갖고 미국의 토마토에서 분리된 균주 SM664-12(acc. NCBI의
Pseudomonas mediterranea의 KC405207.1)입니다. 분리물 3A에 대한 ITS 서열은
GenBank에 등록 번호 2로 기탁되었습니다. OP765279. P. mediterranea에 대한 종-
특이적 프라이머 PC1/1-PC1/2를 사용하여 추가 식별을 수행했습니다(Catara et al.
2000, 2002). 600-bp DNA 단편의 증폭으로 분리된 1-KB와 3A가 P. mediterranea라
는 것이 확인되었습니다. 이 지역의 경우, 분리된 3A의 서열이 GenBank에 acc. 아니
요. OP068273. 바이오 챔버의 화분에서 자란 토마토 식물(품종 Moneymaker)에 대해
병원성을 평가했습니다. 식물은 8잎 단계(BBCH 18)까지 25/20°C 12/12h 암/밝기 체
제에서 재배되었습니다. 접종에는 Pseudomonas mediterranea 분리주 3A를 사용했습
니다. KB 배지에서 48시간 동안 성장시킨 분리물로부터 접종원을 제조하고 희석 플레
이트 수에 따라 멸균 증류수(농도 109 CFU ml-1)에 현탁시켰습니다. 10개의 식물에
10μl의 박테리아 현탁액을 주사기로 줄기에 주입하여 접종했습니다. 5개의 대조 식물에
멸균 증류수를 접종했습니다. 식물 성장 40일 후, P. mediterranea 분리주 3A를 접종
한 모든 식물에서 증상이 나타났습니다. 시들음은 관찰되지 않았고 모든 식물이 살아
있었지만, 윗잎에서는 백화현상이 관찰되었고, 중간잎에서는 백화현상과 괴사가 관찰되
었으며, 기부잎은 시들었다. 줄기의 세로 단면에서는 접종 지점에서 세로 방향의 물 구
덩이가 퍼져 있는 갈색 고과 조직이 드러났습니다. 대조 식물에서는 증상이 관찰되지
않았습니다. 가장 심각한 증상을 보이는 3개 식물에서 재분리된 박테리아는 종특이적
프라이머 쌍 PC1/1-PC1/2를 이용하여 원본과 동일한 것으로 입증되었습니다.
우리가
아는 한, 이것은 크로아티아에서 토마토줄기속썩음병을 일으키는 P.
mediterranea가 처음으로 확인된 것입니다. P. mediterranea에 의한 토마토 속 괴사는
크로아티아 온실 토마토의 중요한 세균성 질병이 될 수 있습니다.
3. 원 문
First Report of Pseudomonas mediterranea Causing Tomato Pith Necrosis in Croatia
Dario Ivi?, Adrijana Novak, Jelena Plavec, Renata Ili?i?, and Tatjana Popovi? Milovanovi?
In May 2021, a tomato producer reported an occurrence of a previously unknown disease in a
greenhouse near Split, Croatia. About 30% of plants (cultivar Signora) were affected. Symptoms
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