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Ⅳ.부록
최소억제농도법(MICs,minimuminhibitoryconcentrations)
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최소억제농도측정은clinical laboratory standards institute(CLSI)의기준에따라액체배지희석법
(broth microdilution method)으로 실시한다. 검사 항생제가 적정 농도별로 코팅된 MIC용
96 well plate를 제작하여 수행하였다. 검사 항생제는 국내 가축에서 많이 사용하거나
사람에서 중요하게 사용되는 항생제를 중심으로 그람양성균에 대한 항생제 10종, 그람음성균에
대한 항생제 16종을 선발하였으며 각 항생제 계열별로 포함되도록 하였다.
가. 재료
순수분리한 균주, 멸균 면봉 또는 일회용 loop, 배양기, Pipette, Pipette tip, 탁도계, Vortex
mixer, 5ml 멸균 증류수, Tryptic soy agar plate(TSA) 또는 Blood agar plate(BAP),
CAMHBT(cation adjusted Mueller-Hinton broth with TES), Lysed horse blood
(streptococci에 사용), 검사 항생제가 농도별로 코팅된 MIC용 plate(CMV1AMAF, KRNV5F),
표준균주(E. coli ATCC 25922, S. aureus ATCC 29213)
나. 균 배양
1) TSA나 BAP에 순수분리한 균주를 획선도말하여 24시간 배양한다.
다. 균 접종액 준비
1) 배양한 균 약 3-5개 집락의 윗부분을 멸균 면봉이나 일회용 loop로 찍어서 5ml 멸균
증류수에 현탁한다.
2) Vortex mixer로 완전히 섞고 탁도를 0.5 McFarland가 되도록 조정한다.
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* 0.5 McFarland = 약 1.5 x 10
CFU/mL
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